2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-

Mô tả sản phẩm:

Tên sản phẩm: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one CAS NO:1234480-50-2

Từ đồng nghĩa:

XMD 8-92 (cơ sở tự do);

6H-Pyrimido[4,5-b][1,4]benzodiazepin-6-one,2-[[2-ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl)phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-;

Tính chất hóa học và vật lý:

Hình ngoài: bột trắng đến trắng

Phân tích: ≥98.0%

Mật độ:1.3 g/cm3

Điểm sôi:741.8°C ở 760 mmHg

Điểm phát sáng:402.4°C

Trong ống nghiệm

XMD8-92 thể hiện sự tương quan lớn nhất đối với BMK1 với hằng số phân ly đo (Kd) 80 nM, trong khi DCAMKL2, TNK1 và PLK4 thể hiện Kd ∆ của 190, 890 và 600 nM, tương ứng.XMD8-92 được phân tích so với tất cả các kinase có thể phát hiện trong lysate tế bào HeLa bằng phương pháp KiNativ và được tìm thấy có tính chọn lọc cao hơn khoảng 10 lần đối với BMK1 với IC50 là 1..5 μM so với các mục tiêu ngoài mạnh nhất, TNK1 (IC50 = 10 μM) và ACK1 (tên gọi là TNK2, IC50 = 18 μM). Các mục tiêu ngoài yếu khác bao gồm miền kinase 2 của RSK1 và RSK2, PIK4A và PIK4B và FAK.MEK5 không bị ức chế đáng kể bởi XMD8-92 ở mức tối đa 50 μM [1]. XMD8-92 cho thấy tính chọn lọc cao đối với BMK1 trong phân tích liên kết cạnh tranh tại vị trí ATP in vitro chống lại 402 kinase cũng như trong phương pháp KiNativ chống lại tất cả các kinase có thể phát hiện trong lysate tế bào HeLa.XMD8-92 ngăn chặn sự kích hoạt BMK1 do EGF gây ra với IC50 240 nM và, với nồng độ cao đến 5 μM, XMD8-92 không có tác dụng ức chế kích hoạt ERK1/2 bởi EGF [2].

In Vivo

XMD8-92 ức chế đáng kể sự phát triển khối u in vivo đến 95%. Dược động học của XMD8-92 được đánh giá ở chuột Sprague-Dawley được tiêm liều tĩnh mạch hoặc đường uống duy nhất. XMD8-92 được tìm thấy có tỷ lệ 2.Thời gian bán hủy 0 giờ: 26 mL/min/kg. XMD8-92 có phân phối mô vừa phải với khối lượng phân phối tính toán là 3, 4 L/ kg. XMD8-92 có khả năng sinh học cao bằng đường uống với 69% liều được hấp thụ.Sau một liều uống duy nhất 2 mg/kg, nồng độ huyết tương tối đa khoảng 500 nM được quan sát thấy sau 30 phút, với 34 nM còn lại 8 giờ sau liều.nồng độ huyết tương cao của thuốc (khoảng 10 μM sau khi dùng IP 50 mg/kg) được duy trì trong suốt 14 ngày. XMD8-92 dường như được dung nạp tốt và chuột trông khỏe mạnh mà không có dấu hiệu đau khổ. Không có sự mất ổn định mạch máu được quan sát thấy ở chuột được điều trị bằng XMD8-92 [1].Điều trị bằng XMD8-92 ở cả chuột có khả năng miễn dịch và thiếu miễn dịch đã ngăn chặn sự phát triển của khối u ghép ngoại tử phổi và cổ tử cung., tương ứng là 95%. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinNgoài ra, BMK1 knockout (KO) ở chuột dẫn đến loại bỏ hoàn toàn và không thể đảo ngược protein BMK1,trong khi điều trị XMD8-92 ở chuột chỉ ức chế hoạt động của BMK1Thứ hai, sự bất ổn mạch máu được quan sát thấy ở chuột KO BMK1 có thể là do thiếu miền không kinase C-terminal của BMK1,vẫn còn có trong quá trình điều trị động vật XMD8-92 [2].

Kiểm tra Kinase

KiNativ profiling của XMD8-92 được thực hiện với cả ATP và ADP acylphosphate-desthiobiotin với các sửa đổi sau.HeLa cell lysates (5 mg/mL tổng protein) được ủ ở sự hiện diện của XMD8-92 ở 50 μM, 10 μM, 2 μM, 0,8 μM và 0 μM trong 15 phút trước khi thêm các đầu dò ATP hoặc ADP acylphosphate (5 μM nồng độ đầu dò cuối cùng).Phản ứng của các thiết bị thăm dò được tiến hành trong 10 phút và phản ứng được dừng lại bằng cách thêm urea và xử lý để phân tích MS. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesDanh sách mục tiêu này được tạo ra và xác nhận bằng cách phân tích đầy đủ trước HeLa lysate.Tối đa bốn ion phân đoạn đặc trưng cho mỗi kinase peptide-probe conjugate được sử dụng để chiết xuất tín hiệu cho mỗi kinase, và so sánh các lysate được điều trị bằng chất ức chế với các lysate đối chứng (không được điều trị) cho phép xác định chính xác tỷ lệ ức chế tại mỗi điểm.Một bản thảo mô tả chi tiết về phương pháp phổ khối lượng nhắm mục tiêu này đang được chuẩn bị [1].

Quản trị động vật

Chuột [1] Các tế bào HeLa 5×105 được ngưng lại trong DMEM và tiêm dưới da vào sườn phải của chuột Nod / Scid 6 tuần tuổi (ngày 0).Chuột được phân loại ngẫu nhiên thành 2 nhóm (6 con)., XMD8-92, 1-28 ngày, và 18 động vật, đối chứng). Nhóm XMD8-92 (1-28 ngày) được điều trị bằng XMD8-92 với liều 50 mg/ kg hai lần mỗi ngày nội mạc.Nhóm kiểm soát được tiêm mỗi ngày dung dịch mang chất như là nhóm kiểm soát.Vào ngày 7, nhóm kiểm soát được ngẫu nhiên phân thành 2 nhóm (6 động vật, XMD8-92, ngày 7-28, và 12 động vật, kiểm soát).Nhóm kiểm soát còn lại được phân loại ngẫu nhiên thành 2 nhóm (6 con vật)., XMD8-92, 14-28 ngày, và 6 động vật, đối chứng). Điều trị bằng XMD8-92 trong nhóm XMD8-92 (7-28 ngày) và XMD8-92 (14-28 ngày) được bắt đầu vào ngày 7 và ngày 14, tương ứng.Kích thước khối u được đo bằng cách sử dụng chèn, và khối lượng khối u được xác định[1].

Địa chỉ:

[1] Yang Q, et al. Sự ức chế dược lý của BMK1 ức chế sự phát triển khối u thông qua protein bạch cầu tuyến nhũ.

[2] Yang Q, et al. Nhắm vào con đường BMK1 MAP kinase trong điều trị ung thư.

[3] Umapathy G, et al. Kinase ALK kích thích kinase ERK5 để thúc đẩy biểu hiện của oncogene MYCN trong u bạch thần kinh. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

Nếu bạn quan tâm đến sản phẩm của chúng tôi hoặc có bất kỳ câu hỏi nào, vui lòng cảm thấy miễn phí để liên hệ với chúng tôi!

Các sản phẩm được cấp bằng sáng chế chỉ được cung cấp cho mục đích nghiên cứu và phát triển.